如何防止和消除PCR实验室气溶胶污染
关键词:气溶胶污染 实验室污染 核酸污染去除 核酸污染去除、核酸实验室污染、核酸污染整体解决方案
为了对新冠疫情防控的常态化管理做好准备,目前国内很多地区都拥有自己的PCR实验室,早在先前,国家卫健委发布《关于加快推进新冠病毒核酸检测的实施意见》,强调了扩大核酸检测范围的重要性,明确了扩大检测范围的能力要求。这意味着许多医疗机构都要建立核酸检测实验室。
一个好的实验室,要时刻注意污染的监测,考虑有无污染,是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。首先,要辨别PCR污染的来源,是环境污染,还是PCR反应液的污染?设立阴阳性对照,有利于检测反应体系各成分的污染情况。尤其是设立空白对照,这对检测试剂中PCR产物残留污染是非常有益的。
在排除试剂污染的可能性,并更换试剂后,若不久又发现试剂被污染了,则考虑可能为环境污染。环境污染的最主要原因是DNA溶液的溅出和DNA气溶胶造成的实验区域的污染,这在PCR产物扩增区尤其容易出现。移液器枪头和EP管架是比较常见的污染部位。
如果是环境污染,还可对每个区域进行涂抹采样和核酸提取,以最终鉴定污染的区域所在。
对PCR的环境污染,有如下几种治理方法:
1、用常规消毒液定期在环境中喷雾消毒处理。
2、稀酸处理法:对可疑器具用1mol/L盐酸擦拭或浸泡,使残余DNA脱嘌呤;此方法缺点是盐酸对皮肤有一定的腐蚀性。
3、紫外照射法:紫外波长一般选择—,照射30分钟至2小时。但需要注意的是,UV照射仅对以上长片段有效,对短片段效果不大。
4、选用商品化的核酸DNA污染祛除剂。
针对核酸实验室的污染问题,市面上许多产品声称可以解决,但其实效果都不太理想。多数品牌无法提供一套有效的整体解决方案,广泛存在消毒不彻底,对空间精密仪器造成不同程度腐蚀等问题。
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