在细胞培养领域，微生物污染是一个长期存在的难题，严重影响实验结果的可靠性和重复性。细菌、真菌、支原体、黑胶虫等污染物不仅会导致细胞生长异常，还可能破坏细胞的正常代谢功能。今天，我们将深入探讨细胞培养中的痛点与挑战，并介绍润联生命科学提供的创新消毒方案，帮助您轻松应对污染问题。

一、细胞培养的痛点与挑战

1)、细菌污染

1、识别方法

• 显微镜观察：细菌呈小而快速移动的颗粒，形状多样，如球形（球菌）、杆状（杆菌）或螺旋形（螺旋菌）。

• pH 变化：培养基 pH 值下降，含酚红的培养基颜色从红色变为黄色或橙色。

• 培养基混浊：培养基浑浊，有絮状物。

• 细菌培养检测：取少量疑似污染的培养基涂布到 LB 琼脂平板或血琼脂平板上，在 37°C 培养 24 小时，观察是否有菌落生长。若平板上细菌成片生长，可确认污染；若只有个别菌落生长，可能是操作污染。

2、处理方法：一旦确认污染，立即弃掉污染的细胞培养物和培养基。用 70% 乙醇或次氯酸钠彻底清洁工作台面、培养箱、离心机等所有接触到污染样品的设备。检查培养基、血清、耗材等无菌材料，严格遵守无菌操作规程，防止再次污染。

2）、霉菌污染

1、识别方法

• 显微镜观察：霉菌呈分支丝状结构，有菌丝、孢子或孢子囊。

• 肉眼观察：培养基表面或培养瓶壁上出现毛茸茸、棉絮状的白色、绿色、黑色或灰色斑点或团块。

• 培养基混浊和颜色变化：培养基浑浊，颜色发绿或发黑。

• pH 变化：培养基 pH 值下降。

• 检测：定期检查培养基透明度和颜色变化，发现异味时警惕。

2、处理方法：立即弃掉污染的培养物和培养基。用 70% 乙醇、次氯酸钠或专门的抗真菌剂彻底清洁所有接触过污染培养物的设备和工具。更换所有可能受污染的耗材。严格遵守无菌操作规程，定期环境监控。

3）、支原体污染

1、识别方法

• 荧光染色法：利用 DAPI 或 Hoechst 染色，在显微镜下观察细胞周围或细胞内是否有亮点。

• PCR 检测：通过 PCR 扩增支原体特异性基因片段，检测细胞培养物中是否存在支原体 DNA。

2、处理方法：丢弃污染的培养物。用次氯酸钠或乙醇彻底清洁所有接触过污染样品的设备和工作区域。使用支原体去除试剂处理污染细胞培养物，处理后用 PCR 检测验证去除效果。若污染严重或去除不彻底，从冻存的无污染细胞库中重新复苏细胞。

4）、“黑胶虫” 污染

对于 “黑胶虫” 污染，目前尚无定论。其可能是血清中某类微生物污染、真菌、支原体污染后细胞凋亡的碎片或细胞分泌的矿物质沉淀。一旦发生污染，建议直接丢弃细胞培养物，更换培养体系特别是血清。若细胞珍贵，可尝试用抗真菌药或抗支原体药物处理，同时更换质量可靠的胎牛血清和细胞培养基。

二、如何预防污染

1、严格无菌操作：在细胞培养过程中，必须严格遵守无菌操作规程，包括使用无菌器械和试剂，避免微生物污染

2、定期清洁和消毒：对培养环境进行定期清洁和消毒，确保实验室空气的无菌性，减少污染风险

3、使用抗生素：在培养基中加入适量的抗生素，如青霉素和链霉素，可以抑制微生物的生长

4、避免交叉污染：确保实验器材和试剂的清洁，避免不同细胞系之间的交叉污染

三、润联的创新解决方案

润联生命科学提供全方位的细胞房消毒方案，采用先进的过氧化氢干雾灭菌技术，能够快速杀灭细菌、真菌、支原体及病毒，真正实现无死角消毒

润联服务优势

1、高效灭菌：通过干雾技术，30分钟内实现对黑色枯草芽孢杆菌6个log的杀灭效果

2、环保安全：无味、无毒，对人体和环境安全，完美替代甲醛熏蒸

3、快速完成：整个灭菌过程仅需2-3小时，不影响第二天的正常使用

4、灵活操作：设备体积小、重量轻，适合大空间和小空间的消毒需求

5、24小时上门服务：在主要一二线城市提供24小时上门消毒服务，随时解决您的需求

润联生命科学旗下的KV-BOX/KV3000干雾系统+专用消毒液的协同灭菌优势：

润联生命科学针对生物医药实验室的支原体污染问题，推出了“专用杀孢子剂+智能雾化设备”的全场景解决方案。该方案已在国内200多家生物医药实验室验证成功，支原体清除率稳定达到99.999%（Log6的杀菌效果）。

1、高效灭菌

广谱杀菌：能够高效杀灭支原体、芽孢、病毒等200多种微生物，完全符合GMP要求。

快速起效：在3分钟内即可杀灭枯草芽孢（ASTM E2197标准），并能穿透高抗性生物膜。

安全环保：无色无味、无毒残留，显著提高细胞培养的存活成功率。

2、方案优势

高效灭菌：通过破坏微生物的细胞膜和细胞壁，实现快速灭菌。

安全环保：替代传统甲醛等有害消毒剂，操作简便且不产生残留，对设备无腐蚀性。

操作灵活：灭菌过程仅需2小时，适用于实验室、物料间、核心罐缝间等各类洁净区，节省生产停机时间。

验证资料齐全：产品在灭菌效果、材料兼容性、残留情况等方面均符合相关法规和标准要求。

成本节约：单位用量小，整体使用成本大幅降低，同时降低了设备维护风险。

3、欧菲姆过氧化氢雾化设备（针对大空间与腔体局部环境）

·多级雾化技术：将消毒液雾化成0.5-10μm颗粒，（接近支原体自身大小），可长时间悬浮于空气中，无孔不入渗透至器械缝隙渗透HEPA过滤器、培养箱密封条等死角；

·数字化监测：配合过氧化氢浓度监测仪，实时显示消毒浓度曲线，确保每立方米空间消毒覆盖率≥99.999%；

·材料兼容：304不锈钢、环氧树脂等36种材料腐蚀率＜0.01%：

·核酸降解：释放自由基（·OH）氧化支原体DNA/RNA，阻断其复制能力。

实验数据VS:

培养箱灭菌

干雾能够渗透到加热模块内部，仅需30分钟处理即可清除支原体污染。相比之下，传统的加热灭菌需要在120℃下持续48小时，不仅能耗高，还会对设备造成损伤。

生物安全柜灭菌

纳米颗粒能够随着气流循环，全面覆盖并渗透HEPA高效过滤器内部，有效解决传统擦拭法无法触及的深层污染问题。

细胞培养是生物技术领域的重要环节，而微生物污染是影响实验结果的关键因素。润联生命科学通过创新的过氧化氢干雾灭菌技术，为实验室提供高效、安全、环保的消毒服务，帮助您轻松应对污染问题，确保实验结果的可靠性和重复性。

如果您对润联的服务感兴趣，欢迎随时联系我们的专业团队，我们将为您提供个性化的解决方案，助力您的科研工作！

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